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550583BD Pharmingen白細胞活化混合物試劑
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BD Pharmingen白細胞活化混合物試劑通過細胞內(nèi)染色檢測細胞因子的細胞內(nèi)積累的最關(guān)鍵步驟是分離和激活細胞群以誘導產(chǎn)生目標細胞因子。如果沒有在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運抑制劑存在下培養(yǎng)的適當激活的產(chǎn)生細胞因子的細胞,在大多數(shù)情況下檢測細胞因子細胞內(nèi)積累的能力會受到嚴重損害。據(jù)報道,刺激細胞產(chǎn)生細胞因子的各種體外方法。多克隆激活劑對于誘導產(chǎn)生細胞因子的細胞特別有用。這些激活劑包括:伴刀豆球蛋白 A、脂多糖、佛波酯加鈣離子載體或離子霉素、植物血凝素、葡萄球菌腸毒素 B 和針對 TCR/CD3 復(fù)合物亞基的單克隆抗體(有或沒有針對共刺激受體的抗體,如 CD28)。
含BD Pharmingen白細胞活化混合物試劑是一種即用型多克隆細胞活化混合物,含有佛波酯、PMA(佛波醇 12-肉豆蔻酸酯 13-乙酸酯)、鈣離子載體(離子霉素)和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運抑制劑 BD GolgiPlug™ (Brefeldin A)。這種混合物可用于從 T 細胞引發(fā)原發(fā)性細胞因子反應(yīng)。使用這種混合物刺激細胞導致細胞因子產(chǎn)生,細胞因子位于產(chǎn)生細胞因子的細胞的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中。細胞因子的這種定位是由蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運抑制劑成分 Brefeldin A 引起的,它阻斷了細胞內(nèi)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運過程。因此,細胞中細胞因子蛋白水平積累的增加增強了免疫熒光染色和流式細胞術(shù)分析對產(chǎn)生細胞因子的細胞的可檢測性。每 100 μL 樣品瓶的內(nèi)容物足以處理多達 50 mL 的細胞培養(yǎng)物(~10^6 個細胞/mL);因此可以刺激 ≥ 5 × 10^7 個細胞。
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